Limiting false-positive polymerase chain reaction results: detection of DNA and mRNA to differentiate viable from dead bacteria
Hideo Kobayashiab, Margret Oethingera, Marion J. Tuohya, Gary W. Procopa, Gerri S. Halla, Thomas W. Bauerab
Received 22 December 2008; accepted 9 April 2009.
Abstract
We compared 2 methods for determining Escherichia coli viability in vitro. A 16S rDNA polymerase chain reaction (PCR) assay detected bacteria irrespective of viability. A groEL mRNA reverse transcriptase PCR was positive for 72 h but later became negative. Detecting mRNA holds promise but is tedious, and groEL may not be the best target.
DNA waves and water
L. Montagnier1,2, J. Aissa2, E. Del Giudice3, C. Lavallee2, A.
Tedeschi4, and G. Vitiello5
1 World Foundation for AIDS research and Prevention (UNESCO), Paris, France
2 Nanetics Biotecnologies, S.A. 98 rue Albert Calmette, F78350 Jouy-en-Josas, France
3 IIB, International Institute for Biophotonics, Neuss, Germany
4 WHITE HB, Milano, Italy
5 Dipartimento di Matematica e Informatica, Universit`a di Salerno and INFN, Gruppo Collegato Salerno, I-84100 Salerno, Italy
Electromagnetic Signals Are Produced by Aqueous Nanostructures
Derived from Bacterial DNA Sequences
Luc MONTAGNIER1;2¤, Jamal AISSA1, St¶ephane FERRIS1,
Jean-Luc MONTAGNIER1, Claude LAVALL¶EE1
1(Nanectis Biotechnologies, S.A. 98 rue Albert Calmette, F78350 Jouy en Josas, France)
2(Vironix LLC, L. Montagnier 40 Central Park South, New York, NY 10019, USA)
Electromagnetic Detection of HIV DNA in the Blood of AIDS
Patients Treated by Antiretroviral Therapy
Luc MONTAGNIER1,2, Jamal AISSA2, Claude LAVALLEE1,
Mireille MBAMY3, JosephVARON4, Henri CHENAL3
1(World Foundation for AIDS research and Prevention (UNESCO), 1 rue Miollis, 75015, Paris, France)
2(Nanectis Biotechnologies, 98, rue Albert Calmette, 78350 Jouy-en-Josas, France)
3(CIRBA Centre Integre de Recherches Biocliniques d’Abidjan, Bd de Marseille, Km 4, BP 2071, 18 Abidjan, Ivory Coast)
4(The University of Texas Health Science Center, 2219 Dorrington Street, Houston, Texas 77030, USA)
mittelspiel написал(а):
что вы прицепились к этому бедному Монтанье. Ему под 80 лет
так ведь и я уже далеко не тинейджер чтобы бабушек и дедушек через дорогу переводить
mittelspiel написал(а):
сам он с пробирками все равно не работал
еще не хватало чтобы он это делал
вот дорастете до нобеля - я хочу посмотреть - будете ли вы пробирки мыть
Precautions and controls
Considering the uncertainty about the safety and reliability of the PCR in routine diagnosis, special precautions should be applied in any laboratory using PCR for detecting infectious agents so as to avoid false-positive or false-negative results. These, together with internal controls (e.g. mimics) assure the safe evaluation of the results, free from false-positive results caused by contamination. True internal controls using house-keeping genes also complete with the target PCR but only for reagents that are in vast excess such as the polymerase and nucleotides. Minimal competition implies that the level of the true target is known, which cannot be the case for field samples. Armoured RNAs allow the mimic to be added in the extraction process, which is a step towards knowing that the extraction has worked. A true internal control provides more confidence that the extraction has been performed correctly. The down side of using housekeeping genes as internal controls is that they can be present in greater amounts than target pathogens.
Идеальных методов в мире нет, есть статистически достоверные и с этим приходится мирится ... надеемся что Люк проводил достаточное количество экспериментов (кажется 16 -18) серий что бы заявить о своем результате (это не 4 серии как в Торонто), конечно хотелось бы убедиться в достоверности полученных данных, но это дело времени ...
ps
Почти что по теме ..
- Вася! Почему у тебя нет порнухи? Ни на компе, ни в
журналах, ни на дисках?
- А зачем? У меня и так память хорошая.
Gabriel M. Mulcahya, Ernest A. Albanese, and Bonita L. Bachl. Reproducibility of the Roche Amplicor Polymerase Chain Reaction Assay for Detection of Infection by Chlamydia trachomatis in Endocervical Specimens
...
The causes of such discrepant results as we observed have not been established. Contamination of specimens by chlamydial DNA is always difficult to rule out completely as a possible cause of false-positive results, and specimen mix-up and technical error are also possible explanations for the discrepancies encountered. In this case, however, other explanations seem more probable. Negative and positive controls have consistently produced expected results in our runs of the assay, and we have found no evidence for a nearest neighbor cross-contamination effect causing false-positive results.
ну и что ? у Монтанье наоборот - она сначала воз негативэ, бат лейтер бикэйм позитывэ
Что вы все время оправдываетесь? Вы - Люк? И вообще, лучшее доказательство - показать на практике, как это работает и приногсит пользу. Именно так и делает Гаряев - сначала статьи с убедительной статистикой (в одной точке измерений по 20 эксп. животных), а затем практика применения на людях с посл. публ. в ВАКовском журнале.
limarodessa
Боярин =
«Простите но откуда взяться информации о последовательности нуклеотидов которые будут составлять будущую ДНК если нет не только матрицы но и праймера (хотя у Монтанье хоть праймер был) ?»
= Ну как откуда ? – путем copy-past из базы данных ncbi
Ну все таки - откуда ? И вот это тоже непонятным осталось:
ОлегК написал(а):
Обман должен происходит ... на квантовом (энтанглмент с телепортацией) ... уровне .... Как раз на квантовом уровне нет никакого мрака и аналогов С, N, P молекулы воды не колышут, так как аналоги сие воскресают из ... энтанглмента между собою
limarodessa написал(а):
ну и как вот в этом вот эксперименте arxiv.org/abs/1012.5166
может возникнуть квантовая сцепленность между молекулами воды во второй пробирке и молекулами ДНК в первой ? Спрашиваю это потому что для осуществления телепортации квантовая сцепленность небходима. А для того чтобы во второй пробирке появились фосфор, углерод и азот другого пути как телепортация не существует (ну разве что еще ядерные реакции, что несерьезно)
для того чтобы во второй пробирке появились фосфор, углерод и азот другого пути как телепортация не существует (ну разве что еще ядерные реакции, что несерьезно)
теоретически азот и углерод содержатся в воздухе, а пробирка Монтанье явно не содержалась в глубоком техническом вакууме. Но были ли там замечены химические реакции с воздухом ? Кроме того - в воздухе нет фосфора. Но даже если мы будем отталкиваться от того что исходная матрица ДНК не нужна а фосфор, углерод и азот поступили при добавлении лаборантом необходимых компонентов при ПЦР - что же все таки послужило исходной матрицей в чистой воде ?
То mittelspiel
Посадник
Последний визит:
Сегодня 17:04:43
«что вы прицепились к этому бедному Монтанье. Ему под 80 лет, сам он с пробирками все равно не работал..»
= Ну может он решил развлечься – типа пописать в муравейник, после литра маотая.
То limarodessa написал(а):
«для того чтобы во второй пробирке появились фосфор, углерод и азот другого пути как телепортация не существует (ну разве что еще ядерные реакции, что несерьезно)»
И дал ссылку на очередной его «claimed”
= там было :
«2) The electromagnetic signals (EMS) are not linearly correlated with the initial number of
bacterial cells before their filtration. In one experiment the EMS were similar in a suspension
of E. coli cells varying from 109 down to 10. It is an all or none phenomenon.»
= хороший разброс «не линейности»
«3) EMS are observed only in some high water dilutions of the filtrates. For example, from
109 to 1018 dilutions in some preparations of E. coli filtrates.»
«5) Some bacteria are not producing EMS: this is the case of probiotic bacteria such as
Lactobacillus and also of some laboratory strains of E. coli used as cloning vector.»
= странно, что наблюдали штамм-зависимость. И штаммы E. coli не являются векторами для клонирования сами по себе, а используются как хозяева этих векторов (опять небрежность в текстах).
«DNA signalling is stimulated by 7 Hz naturally occurring waves on earth.
Waves produced by the human brain are also in the range of 7 Hz. These are interesting
questions to be asked and possibly answered.»
= это как стучать палкой по голове 7 раз в секунду. Но не по молекулам ДНК. У них собственные колебания – десятки гигагерц. Хотя в гармониках я туп, как пионер. Типа на уровне – в ряды Фурье – становись! Октавы – запевай! И интересный походу вопрос возник - а будет ли вода «телепортировать» сама себя, если ее разводить в спирте. Как гомеопаты. Хотя ответ ясен – будет около 4% трезвой информации. У гомеопата.
= а насчет фосфора, он не обязателен в установлении порядка водородных связей, это скелет. Он может быть и на основе пептидной связи (PNA типа). И других. И азот тоже не так важен. Важны расстояния и их порядок (код по сути). В воде водорода и кислоророда много ведь. Но вот как у него (телепорта Люка ) на «98%» возник правильный ответ, во «втрой побирке», из 104 нуклеотидов ВИЧ (и в добавок еще жизнеспособный геном микоплазмы) – пусть думает он сам. Я не верю, что он жулик. Хотя с ВИЧ – обманул = этот вирус не есть инфекционный агент. По понятиям Пастера.
Всего.
Особый респект товарищам Паулите и Чукча не из Сибири и Всем тоже.
Подождем месяц ? Я кого мог уже напряг. Клеточников.
limarodessa
Боярин =
«Простите но откуда взяться информации о последовательности нуклеотидов которые будут составлять будущую ДНК если нет не только матрицы но и праймера (хотя у Монтанье хоть праймер был) ?»
= Ну как откуда ? – путем copy-past из базы данных ncbi
- лет сто назад тебя бы приняли за колдуна, умеющего текстовую информацию передавать легким нажатием мышки. Последовательность нуклеотидов в ДНК, не более, чем информация о строительным материале, полипептидов. Они могут выполнять и каталитические функции. Уменьшать энергетический барьер химической реакции.
Но есть странность. Микроволновая химия. Там некоторые реакции вообще не идут без СВЧ (2.45 ГГц), или ускоряются на порядки. При равных температурах и давлении. Энергии квантов там не хватает на порядки.
Такую же странность описывают, начиная с Гурвича. Монтанье = их внук.
=== мы не понимаем пока , что есть реальность. Гологафическая Вселенная озадачивает не мешьше.
Физика кольцевых струн очень хорошо вписалась в одну любопытную теорию — так называемую теорию зеркального мира. Эта теория утверждает, что у каждого сорта элементарных частиц существует партнер. Так, обычному электрону соответствует зеркальный электрон (не позитрон!), который тоже имеет отрицательный заряд, обычному протону соответствует положительный зеркальный протон, обычному фотону — зеркальный фотон и так далее. Эти два сорта вещества никак не связаны: в нашем мире не видны зеркальные фотоны, мы не можем регистрировать зеркальные глюоны, бозоны и прочие переносчики взаимодействий. Но гравитация остается единой для обоих миров: зеркальная масса искривляет пространство так же, как и масса обычная. Другими словами, могут существовать структуры типа двойных звезд, в которых один компонент — обычная звезда нашего мира, а другой — звезда из мира зеркального, которая для нас невидима. Такие пары звезд действительно наблюдаются, и невидимый компонент обычно считают “черной дырой” или нейтронной звездой, которые не излучают света. Однако он может оказаться звездой из зеркального вещества. И если эта теория справедлива, то кольцевые струны служат проходом из одного мира в другой: пролет сквозь кольцо равноценен повороту частиц на 180°, их зеркальному отражению. Наблюдатель, пройдя через кольцо, поменяет свою зеркальность, попадет в другой мир и исчезнет из нашего. Тот мир не будет простым отражением нашей Вселенной, в нем будут совсем другие звезды, галактики и, возможно, совсем другая жизнь. Вернуться путешественник сможет, пролетев сквозь это же (или любое другое) кольцо обратно
Космические струны - гипотетические образования, которые были вынуждены придумать ученые, чтобы хоть как-то объяснить для себя строение Вселенной. По мнению космофизиков, космические струны - тонкие трубки из симметричного высокоэнергетического вакуума, пересекающие наш мир, как паутина, из конца в конец.
Первая работа о них была написана в 1976 году Т. Кибблом из Имперского колледжа науки и техники в Лондоне. Толщина космических струн ничтожна (примерно 10 в минус тридцатой степени сантиметра), а вес одного такого сантиметра огромен (около 10 в шестнадцатой степени тонн). Если такая струна пересечет человека в поясе, его голова и ноги (по закону всемирного тяготения) сложатся со скоростью 6 километров в секунду. Примерно то же произойдет и с нашей планетой - струна из вакуума мгновенно рассечет ее на части, как проволочная яйцерезка.
По счастью, ближайшие струны (если они вообще существуют) находятся, как утверждают специалисты, на расстоянии 300 миллионов световых лет от Земли.
Теоретическая физика предлагает нам в очередной раз круто изменить представления о мире. Элементарные частицы оказались колебаниями неких микроскопических суперструн, вибрирующих в шестимерном пространстве (см. Наука и жизнь №№ 2, 3, 1997 г.). А в нашей Вселенной, кроме звезд, планет, пылевых и газовых туманностей, обнаружились другие, тоже совершенно невероятные объекты - космические струны. Они тянутся через всю Вселенную от одного ее горизонта до другого, скручиваются, рвутся и сворачиваются в кольца, выделяя громадное количество энергии
По всей видимости опыты будет ставить ... и не только с наливными яблочками ...но и инсулином и глюкозой, что бы поддержать нашего Васю Паулиту ...
ps
почти как тут ..
Вы едете в своем авто на рыбалку. Это хорошо. На дороге голосует одинокая девушка. Это здорово. Вы решаете подвезти ее. В дороге она теряет сознание. Это плохо. Вы везете ее в больницу. Доктора говорят, что она беременна и поздравляют вас. Это очень плохо. Вы утверждаете, что ребенок не ваш, она утверждает обратное. Это - стресс. Вы требуете провести анализ ДНК, который подтверждает, что ребенок не ваш. Это - облегчение. Доктор также сообщает, что у вас врожденное бесплодие.
Это ужасно. Но вдруг вы вспоминаете, что у вас с вашей законной женой трое детей...
что вы прицепились к этому бедному Монтанье. Ему под 80 лет, сам он с пробирками все равно не работал, а соавторы у него даже не из научных институтов...
www.nndb.com/people/530/000176999/
Gender: Male
Race or Ethnicity: White
Sexual orientation: Straight
Occupation: Scientist, Doctor Son: Jean-Luc Montagnier
However when the filtrates were incubated for two weeks (100 nM filtrate) or three weeks (20 nM filtrate) with a culture of human activated T lymphocytes, the mycoplasma was recovered in the medium with all its original characteristics as previously observed.
Mycoplasma are everywhere. Every lab I know has had a mycoplasma-contaminated cell culture hood at some point. You won't find a modern laboratory without warning signs about mycoplasma everywhere. They're very annoying and easily infect growing cells. He has not proven that the mycoplasma weren't gained from the environment, he only says that his PCR (can we trust his PCR? He does not give a concise protocol, not the source of his PCR primers) was sufficient to say 'it wasn't there after filtering'. That doesn't rule out contamination. If this were a real paper, they would have included specific antibiotics to rule out contamination. Indeed, they have not used antibiotics as a negative control. It's absurd.
I could go on all day about how bad this paper is. But the fact that it couldn't be published in a real journal speaks for itself.
This is a common tactic of the homeopathy and alternative medicine crowd: argue on authority instead of evidence. They hope that the glamour of saying Oh, a professor says it works! will be enough to convince people. It isn't. Science doesn't work on qualifications, prestige or reputation. It's all about the data.
This guy isn't the first Nobel prize winner to be horribly mistaken, and he won't be the last. Max Perutz, before his death, also supported bizarre fringe ideas (such as amyloid being water-filled nanotubues) which was refuted by two independent labs after his death. Try actually reading the papers critically, instead of swallowing titles.
кольцевые струны служат проходом из одного мира в другой: пролет сквозь кольцо равноценен повороту частиц на 180°, их зеркальному отражению. Наблюдатель, пройдя через кольцо, поменяет свою зеркальность, попадет в другой мир и исчезнет из нашего. Тот мир не будет простым отражением нашей Вселенной, в нем будут совсем другие звезды, галактики и, возможно, совсем другая жизнь. Вернуться путешественник сможет, пролетев сквозь это же (или любое другое) кольцо обратно
Наблюдатель, пройдя через кольцо, поменяет свою зеркальность, попадет в другой мир и исчезнет из нашего. Тот мир не будет простым отражением нашей Вселенной, в нем будут совсем другие звезды, галактики и, возможно, совсем другая жизнь
А я то думаю - чего это Петрович опять исчез ? А это он оказывается в другом мир сейчас. Наверное его теорию там признали в отличие от нашего мира.
Main outcome of study (according to author)
The data revealed the increased enzyme activity of the L-lactate dehydrogenase upon microwave exposure at the two particular frequencies 500 MHz and 900 MHz. The opposite effect was found with the microwave frequencies of 650 MHz, 700 MHz and 750 MHz (LDH enzyme activity was decreased). The results suggest that this specific biological process can be modulated by the defined frequencies of microwave exposure.
Условия : 500 MHz, 5 мин, power - 8.97 mW, electric field strength: 2.0 mV/m
700 МГц, 5 мин, power - 8.81 mW , electric field strength: 2.5 mV/m
А эффект противоположный.
= «нет нагрева».
« specific microwave effect »
Публикаций много. Есть и противоположные, где только термальный наблюдали
По всей видимости опыты будет ставить ... и не только с наливными яблочками ...но и инсулином и глюкозой, что бы поддержать нашего Васю Паулиту ...ps почти как тут ..
Не = мне пока вполне достаточно разводить воду (или чай) в спирте. Каплю на стакан и тд.
Extreme homeopathic dilutions retain starting
materials: A nanoparticulate perspective
Homeopathy is controversial because medicines in high potencies such as 30c and 200c
involve huge dilution factors (1060 and 10400 respectively) which are many orders of
magnitude greater than Avogadro’s number, so that theoretically there should be no
measurable remnants of the starting materials. No hypothesis which predicts the
retention of properties of starting materials has been proposed nor has any physical entity
been shown to exist in these high potency medicines. Using market samples of metalderived
medicines from reputable manufacturers, we have demonstrated for the first
time by Transmission Electron Microscopy (TEM), electron diffraction and chemical
analysis by Inductively Coupled Plasma-Atomic Emission Spectroscopy (ICP-AES), the
presence of physical entities in these extreme dilutions, in the form of nanoparticles of
the starting metals and their aggregates. Homeopathy (2010) 99, 231e242.
